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益生菌發(fā)酵棗粉噴霧干燥條件的優(yōu)化
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紅棗是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高的果品,含有豐富的維生素C、維生素P、多糖及二磷酸腺苷和三萜類(lèi)化合物。目前,市場(chǎng)上的紅棗產(chǎn)品以干制棗為主。益生菌發(fā)酵棗粉是一種新型的休閑食品,不僅具備紅棗的抗氧化、保護(hù)腸胃等營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,還具備相應(yīng)益生菌調(diào)節(jié)腸道菌群等益生功能,且更易儲(chǔ)存和運(yùn)輸,是一種良好的營(yíng)養(yǎng)深加工產(chǎn)品,成為近年來(lái)?xiàng)椆罴庸さ囊环N趨勢(shì)。
目前常用的干燥技術(shù)有噴霧干燥、微波干燥、真空冷凍干燥、熱風(fēng)干燥、膨化干燥等,其中噴霧干燥法是果蔬粉加工最常用的方法。噴霧干燥法制備的果蔬粉具有含水量低、營(yíng)養(yǎng)成分保存好、溶解性好、成本較低等優(yōu)點(diǎn),但也存在熱敏性成分損失的缺點(diǎn)。利用該方法生產(chǎn)的產(chǎn)品主要有番茄粉、棗粉、獼猴桃粉、龍眼粉、芒果粉等,均有良好的效果。
本試驗(yàn)通過(guò)噴霧干燥法,以脫脂乳粉為助干劑,對(duì)噴霧干燥條件進(jìn)行優(yōu)化,以期制備高活菌數(shù)、低含水量、高營(yíng)養(yǎng)、感官評(píng)價(jià)良好的發(fā)酵益生菌發(fā)酵棗粉。
材料與方法 
1.材料與試劑 
靈武紅棗:市售;植物乳桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌;LB肉湯培養(yǎng)基、MRS肉湯培養(yǎng)基;瓊脂粉;試驗(yàn)所用試劑均為分析純。
2.方法 
2.1工藝流程及操作要點(diǎn) 
發(fā)酵棗漿→添加助干劑→噴霧干燥→益生菌發(fā)酵棗粉
發(fā)酵棗漿(由前期試驗(yàn)得到):植物乳桿菌和凝結(jié)芽孢桿菌按3%和1%的接種量接種于滅菌棗漿中,混菌發(fā)酵18h,溫度為37℃。發(fā)酵結(jié)束后測(cè)定發(fā)酵棗漿的活菌數(shù)為1.62×108CFU/mL。
添加助干劑:向發(fā)酵棗漿中添加一定量的脫脂乳粉(助干劑),攪拌均勻,防止噴霧干燥過(guò)程中堵塞細(xì)管。
噴霧干燥:在一定條件下對(duì)發(fā)酵棗漿進(jìn)行噴霧干燥。
益生菌發(fā)酵棗粉:噴霧干燥結(jié)束后,待出口溫度降至90℃后及時(shí)收集益生菌發(fā)酵棗粉,稱(chēng)質(zhì)量。計(jì)算出粉率、測(cè)定含水量、活菌數(shù)和堆積密度,同時(shí)記錄感官評(píng)分。
2.2單因素試驗(yàn) 
噴霧干燥機(jī)進(jìn)口溫度的確定:其他條件確定不變,進(jìn)口溫度分別設(shè)置為140℃、150℃、160℃、170℃,通過(guò)考察益生菌發(fā)酵棗粉的感官評(píng)分、出粉率、含水量、堆積密度、活菌數(shù)確定噴霧干燥機(jī)進(jìn)口溫度。
噴霧干燥機(jī)霧化流量的確定:其他條件確定不變,霧化流量分別設(shè)置為414L/h、473L/h、536L/h、601L/h,通過(guò)考察益生菌發(fā)酵棗粉的感官評(píng)分、出粉率、含水量、堆積密度、活菌數(shù)確定噴霧干燥機(jī)霧化流量。
噴霧干燥機(jī)蠕動(dòng)泵速的確定:其他條件確定不變,調(diào)整蠕動(dòng)泵速分別為10%、20%、30%、40%,通過(guò)考察益生菌發(fā)酵棗粉的感官評(píng)分、出粉率、含水量、堆積密度、活菌數(shù)確定噴霧干燥機(jī)的蠕動(dòng)泵速。
脫脂乳粉添加量的確定:調(diào)整脫脂乳粉添加量為1.5%、2.5%、3.5%、4.5%,蠕動(dòng)泵速為20%,霧化流量為473L/h,進(jìn)口溫度為150℃,通過(guò)考察益生菌發(fā)酵棗粉的感官評(píng)分、出粉率、含水量、堆積密度、活菌數(shù)確定最佳脫脂乳粉的添加量。
2.3響應(yīng)面分析試驗(yàn) 
在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,根據(jù)Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)4因素3水平響應(yīng)面試驗(yàn),以進(jìn)口溫度(A)、霧化流量(B)、蠕動(dòng)泵速(C)、脫脂乳粉添加量(D)為評(píng)價(jià)因素,以感官評(píng)分(Y)為響應(yīng)值進(jìn)行響應(yīng)面分析,響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平見(jiàn)表1。 
2.4測(cè)定方法 
益生菌發(fā)酵棗粉出粉率的計(jì)算:  
水分的測(cè)定:準(zhǔn)確稱(chēng)量益生菌發(fā)酵棗粉2g置于已質(zhì)量恒定的有蓋稱(chēng)量瓶中,置于105℃的恒溫鼓風(fēng)干燥箱中干燥2~4h,蓋好蓋子取出,在干燥器內(nèi)冷卻0.5h后稱(chēng)質(zhì)量。重復(fù)操作,直至前后的稱(chēng)量差<2mg即為質(zhì)量恒定。 
活菌數(shù)檢測(cè):傾注平板計(jì)數(shù)法:取1g樣品加入9mL滅菌后的生理鹽水,用渦旋振蕩器充分混合均勻后,采用10倍系列稀釋?zhuān)x擇3個(gè)合適稀釋度的樣品均液,各取1mL加入無(wú)菌玻璃平板中,倒入滅菌后的MRS培養(yǎng)基,放入37℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每個(gè)梯度做三組平行,取平均值。  
1.進(jìn)口溫度對(duì)益生菌發(fā)酵棗粉的影響 
當(dāng)進(jìn)口溫度低于150℃時(shí),隨著進(jìn)口溫度的升高,干燥越來(lái)越充分,使出粉率和感官評(píng)價(jià)升高,同時(shí)含水量和堆積密度下降,說(shuō)明益生菌發(fā)酵棗粉的顆粒變小。當(dāng)進(jìn)口溫度為150℃時(shí)出粉率、感官評(píng)分、活菌數(shù)最大,分別為39.56%、95.6分、1.83×109CFU/g,堆積密度最小為0.252g/mL,含水量為4.17%。當(dāng)進(jìn)口溫度高于150℃時(shí),隨著溫度繼續(xù)升高,益生菌存活率迅速下降,粘壁現(xiàn)象嚴(yán)重,使出粉率和感官評(píng)定下降,益生菌發(fā)酵棗粉的顆粒變大,導(dǎo)致棗粉的堆積密度增大。因此選擇進(jìn)口溫度150℃為宜。
2.霧化流量對(duì)益生菌發(fā)酵棗粉的影響  
當(dāng)霧化流量<473L/h時(shí),隨著霧化流量的增大,噴霧液滴越來(lái)越小,霧化效果越來(lái)越好,干燥速度變快,活菌存活率升高,出粉率和感官得分增大,含水量和堆積密度變小,益生菌發(fā)酵棗粉的顆粒越來(lái)越小,棗粉質(zhì)量越來(lái)越高。當(dāng)霧化流量增大至473L/h時(shí),出粉率、感官評(píng)分、活菌數(shù)最大,分別為39.15%、94.9分、1.82×109CFU/g,堆積密度最小為0.256g/mL,含水量為4.16%。當(dāng)霧化流量>473L/h時(shí),由于噴霧液滴過(guò)小,干燥過(guò)程中水分蒸干帶走少量的熱量,所以活菌數(shù)迅速下降,出粉率略微下降。由于噴霧干燥過(guò)程過(guò)高的溫度,使益生菌焦糊嚴(yán)重,感官評(píng)價(jià)也快速下降,導(dǎo)致含水量和堆積密度變小。因此選擇霧化流量473L/h為宜。
3.蠕動(dòng)泵速對(duì)益生菌發(fā)酵棗粉的影響 
由圖3可知,當(dāng)蠕動(dòng)泵速<20%時(shí),隨著蠕動(dòng)泵速的增大,感官評(píng)價(jià)基本不變,由于棗的噴霧效果更充分,出粉率增大,由于蠕動(dòng)泵速增大,平均噴霧液滴增大,在干燥成粉的過(guò)程中蒸干的水分帶走更多的熱量,所以活菌數(shù)略微升高,含水量略微上升,堆積密度略微下降。當(dāng)蠕動(dòng)泵速為20%時(shí),出粉率、感官評(píng)分、活菌數(shù)最大,分別為39.43%、93.8分、1.82×109 CFU/g,堆積密度最小為0.253 g/mL,含水量為4.12%。當(dāng)蠕動(dòng)泵速>20%時(shí),由于物料的干燥越來(lái)越不充分,所以益生菌發(fā)酵棗粉的含水量快速上升,導(dǎo)致感官評(píng)定下降,堆積密度不斷上升,說(shuō)明益生菌發(fā)酵棗粉的顆粒越來(lái)越大。粘壁現(xiàn)象嚴(yán)重,導(dǎo)致出粉率下降,活菌數(shù)下降。因此選擇蠕動(dòng)泵速20%為宜。 
4.脫脂乳粉添加量對(duì)益生菌發(fā)酵棗粉的影響 
當(dāng)脫脂乳粉添加量<2.5%時(shí),隨著脫脂乳粉的添加量增加,由于可溶性固形物含量升高,出粉率不斷升高,含水量和堆積密度變小,說(shuō)明益生菌發(fā)酵棗粉的顆粒變小,同時(shí)對(duì)益生菌的保護(hù)效果越來(lái)越好,使益生菌存活率升高,當(dāng)脫脂乳粉添加量升至2.5%時(shí),出粉率、感官評(píng)分、活菌數(shù)達(dá)到最大,分別為39.56%、96.5分、1.82×109CFU/g,含水量最小為4.15%,堆積密度為0.254 g/mL。當(dāng)脫脂乳粉添加量>2.5%時(shí),由于脫脂乳粉含量過(guò)大,棗粉特有的香氣和顏色被掩蓋,所以隨著脫脂乳粉繼續(xù)增大,感官評(píng)定開(kāi)始下降?扇苄怨绦挝锖窟^(guò)大,反而影響噴霧效果,所以出粉率也開(kāi)始下降,過(guò)大比例的脫脂乳粉, 相當(dāng)于益生菌發(fā)酵棗粉被稀釋?zhuān)曰罹鷶?shù)開(kāi)始下降,含水量和堆積密度開(kāi)始微上升,說(shuō)明益生菌發(fā)酵棗粉的顆粒大小略增大。因此選擇脫脂乳粉添加量2.5%為宜。
5.響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果 
以進(jìn)口溫度(A)、霧化流量(B)、蠕動(dòng)泵速(C)、脫脂乳粉添加量(D)為自變量,以感官評(píng)分(Y)為響應(yīng)值進(jìn)行Box-Behnken響應(yīng)面分析   
6.益生菌發(fā)酵棗粉香氣成分的測(cè)定  
經(jīng)過(guò)益生菌發(fā)酵的棗漿制備的棗粉之所以感官評(píng)價(jià)較高,是因?yàn)闂棟{在發(fā)酵過(guò)程中乙酸、癸酸等一些酸味較重影響口感的物質(zhì)逐漸減少,產(chǎn)生一些使棗粉更加醇香的物質(zhì),如乙酸甲酯、辛酸甲酯、月桂酸甲酯等以及一些對(duì)香氣有好的影響的烷類(lèi)、醇類(lèi),使益生菌發(fā)酵棗粉更加醇香。
8.益生菌發(fā)酵棗粉理化指標(biāo)及營(yíng)養(yǎng)成分 
測(cè)得最佳工藝條件的益生菌發(fā)酵棗粉的活菌數(shù)為1.78×109CFU/g,含水量為3.82%,堆積密度為0.251g/mL,多糖含量為(3.1±0.05)mg/g,總酸含量為(368±5)mg/g,乳酸含量為(73±2)mg/g。
由響應(yīng)面分析試驗(yàn)可得益生菌發(fā)酵棗粉噴霧干燥最佳工藝參數(shù)為蠕動(dòng)泵速20%、霧化流量475L/h、進(jìn)口溫度150℃、脫脂乳粉添加量2.5%,在此優(yōu)化條件下得到益生菌發(fā)酵棗粉出粉率為39.15%,感官評(píng)定為95.6分。
測(cè)得最佳工藝條件下益生菌發(fā)酵棗粉的活菌數(shù)為1.78×109CFU/g,含水量為3.82%,堆積密度為0.251g/mL,多糖含量(3.1±0.05)mg/g,總酸含量(368±5)mg/g,乳酸含量(73±2)mg/g。測(cè)得的益生菌發(fā)酵棗粉香氣成分相比于未發(fā)酵棗漿棗粉更豐富多樣,闡明了益生菌發(fā)酵棗粉香氣醇厚的原因。采用脫脂乳粉作為助干劑相比于傳統(tǒng)助干劑β-環(huán)糊精等在出粉率、感官評(píng)定和活菌數(shù)存活率方面都有很大優(yōu)勢(shì)。

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